タンパク質ペプチド医薬品の多くは生理活性物質であるため、

タンパク質ペプチド医薬品はほとんどが生理活性物質であり、生物学的活性は薬物の一次構造だけでなく、二次構造や三次構造とも密接に関係しているため、バイオアッセイはこのクラスの薬物動態を研究するためのユニークかつ必要な方法です。 バイオアッセイには、体液中の薬物濃度を直接測定することと、標識薬物の生物学的活性を特定することの 2 つの目的があります。 その方法は 2 つの主なカテゴリに分類できます。
1.1.1 In vivo 解析 インスリン等を用いた従来のマウス血糖法に加え、各種タンパク質ポリペプチドの生物活性に応じて確立された各種法、例えばウサギ実験における IL-8 動員好中球などIL-8 の性質により、骨から多数の好中球を動員することができます [1]。 このタイプの方法は生物学的活動を最も直感的に反映しますが、動物全体が対象となり、時間と労力がかかり、感度が低く、ばらつきが大きくなります。
1.1.2 NGF などの in vivo 組織 (細胞) 分析は、ニワトリ後根神経節の成長を刺激する、ラットの ex vivo 子宮法などのオキシトシンを刺激します。分子生物学の発展に伴い、多くの特異的で高感度な依存性細胞株が確立されています。そして細胞培養が最も一般的な方法となっています。 タンパク質ペプチドと細胞との相互作用のさまざまなメカニズムに応じて、多くの特定の操作があります。 増殖アッセイなどは高速かつ高感度ですが、特異性がわずかに劣ります。 増殖防止という意味では、検出システムはシンプル、高感度、特異的です。 細胞変性効果低減アッセイ [2] は、インターフェロンなどの抗ウイルス活性を持つ薬剤に基づいており、細胞をウイルス損傷から保護します。この方法は直感的で感度が高いですが、ペプチド サブタイプによって妨害される可能性があります。 上記の方法は細胞数の増減を定量的かつ有効な指標としており、計数方法には直接計数法と間接計数法があり、後者にはMTT法、同位体（3H、14C）取り込み法などが含まれます。また、免疫検出と組み合わせた抗体誘導法[3]、酵素反応と組み合わせた酵素誘導分解法[4]など、卵白ポリペプチドと細胞との間接的相互作用に基づく検査もあります。 一般に、細胞培養法には感度と特異性、客観性と信頼性という利点がありますが、欠点も明らかです。 第一に、バイオアッセイでは不活性な小さな代謝産物を定量化し、生体内での動態を追跡することができません。 第二に、サンプルのほとんどはヒトまたは動物の血清中に存在し、血清中の内因性物質の干渉や考えられる内因性因子の交差反応がメソッドの特異性に影響します。 さらに、生物学的プロセスを開始するには閾値サイトカインが必要となることが多く、これによりこの方法の感度が低下します。 依存性株細胞の長期培養は、アッセイの特異性に影響を与える突然変異を起こしやすくなります。